Акафист состоит из 13 кратких кондаков и 12 более подробных икосов. Все кондаки, кроме первого, заканчиваются словом «аллилуйя» («Восхвалите Господа»). В икосах много раз повторяется возглас «радуйся». После этого возносится молитва Матроне Московской и тропарь.